Как происходит взятие ПЦР на туберкулез

ПЦР на туберкулез позволяет врачу вовремя обнаружить очаг инфекции и изолировать больного, назначив курс терапии. Анализ определяет резистентность палочки Коха к воздействию химических препаратов. Фтизиатр составляет план комплексного лечения, основываясь на результатах исследования.

Что такое ПЦР

Полимеразная реакция — один из методов, применяемых в молекулярной биологии. С его помощью удается увеличить небольшую концентрацию ДНК в пробе.

Во время исследования проводят работу с нуклеиновыми кислотами:

• осуществляют процесс мутации;
• соединяют участки молекул.

Полимеразный тест основан на многократном тиражировании участка нуклеиновой кислоты благодаря использованию ферментов in vitro.

Как работает метод ПЦР

Полимеразная цепная проба является информативной. С ее помощью при исследовании мокроты или урины удается быстро установить количество возбудителя в организме.

Изучение крови не дает такого точного результата, т. к. ДНК палочки Коха находится в жидкой среде только у больных туберкулезным сепсисом. С помощью ПЦР врач в течение 1-2 часов определяет возбудителя болезни.

Диагностика, проводимая вместо Манту, имеет следующие достоинства:

• 100% гарантию выявления микобактерий;
• высокую специфичность;
• быстрый результат в течение 4 часов.

Необходимость проведения анализа

Туберкулез — инфекционное заболевание, которое вызывает палочка Коха. Эффективное лечение невозможно без своевременной постановки диагноза. Исследование с помощью ПЦР безопасно для человека. Проверку на инфицирование назначают беременным, людям, находившимся в контакте с туберкулезным больным.

В случае развития у пациента аллергии на постановку пробы Манту терапевт назначает ПЦР для выявления микобактерий. ВИЧ-инфицированные больные регулярно сдают тест.

Диагностика туберкулеза с помощью цепной реакции не приносит вреда здоровью малолетнего, позволяет вовремя выявить заболевание, в отличие от бактериологического исследования, которое выполняют в течение 30 суток. Диаскинтест нередко вызывает развитие побочных явлений у ребенка, поэтому врач рекомендует постановку ПЦР.

Показание к методу

С помощью полимеразного теста определяют болезнь в том случае, когда отсутствуют ее симптомы. Врач также направляет пациента на обследование при подозрении на первичное инфицирование микобактерией туберкулеза.

ПЦР назначают, когда больной не может посетить лабораторию. Материал, необходимый для изучения, доставляют родственники пациента. Посев мокроты осуществляют работники туберкулезного диспансера на дому.

Исследование назначают больному перед операцией, результат будет готов через несколько часов.

Возможные противопоказания

Для этого метода исследования не существует запретов. Анализ сдает больной ОРВИ или человек, страдающий другим заболеванием.

Врач-фтизиатр не рекомендует проводить исследование после прививки или курсового лечения противотуберкулезными лекарственными средствами, т. к. микобактерии, оставшиеся в организме, могут искажать результаты проверки.

Разновидности анализа

Для установления наличия патологического процесса в организме берут следующий биоматериал:

• кровь;
• выделения из половых органов;
• мочу;
• слюну;
• мокроту.

ПЦР крови выполняют в утренние часы, пациент сдает биоматериал натощак.

Существует несколько видов исследования:

• ПЦР с обратной транскрипцией;
• определение инвертированного ответа;
• вложенный метод;
• асимметричная проверка, изучающая 1 цепь исходной ДНК;
• количественное определение, которое применяется для наблюдения за числом ПЦР в каждом цикле.
• ступенчатое исследование, указывающее на связывание праймеров отдельных групп;
• специфическая проверка, для которой характерно использование консервативных феромонов.

Взятие крови

Через 48 часов врач получает информацию о стадии заболевания и степени поражения органов. Для исследования берут материал из вены. Однако анализ крови на туберкулез неинформативен, хотя результат поступает к врачу на следующий день.

Биологическую жидкость исследуют при подозрении на инфицирование пациента палочкой Коха, заменяя ПЦР пробу Манту, а также при наличии противопоказаний к ее выполнению.

При туберкулезе внутренних органов с помощью полимеразного теста проверяют эффективность назначенного лечения.

Проба со слюны

Анализ секрета выполняют, изучая последовательность ДНК, которая специфична для нескольких видов заболевания.

Достоинства исследования, основанного на изучении слюны:

• быстрый результат;
• высокая точность;
• минимум противопоказаний к проверке;
• отсутствие побочных эффектов;
• точное определение типа возбудителя.

К недостаткам относятся:

• большая вероятность получения ложного результата;
• риск развития заболеваний ротовой полости;
• наличие противопоказаний.

Забор мокроты

Исследование назначает врач. Наличие инфекционного процесса в организме устанавливают в течение 2-3 часов.

Перед сдачей материала для анализа пациенту необходимо выпить отхаркивающий препарат или сделать ингаляцию на основе лекарственных трав. Больной заранее приобретает стерильную тару для сбора мокроты на туберкулез.

Выделения собирают в контейнер после ополаскивания полости рта. Слюну необходимо выплюнуть.

Пациент отхаркивает вязкую слизь и сплевывает ее в приготовленную емкость. Собранный материал доставляют в лабораторию.

ПЦР мочи

Больной заранее готовится к сдаче урины. За 2 суток до исследования необходимо отказаться от половых контактов. Следует предупредить врача о приеме лекарственных средств, т. к. они влияют на результат анализа.

Перед исследованием больной не завтракает. Урину сдают в лабораторию рано утром.

Для проведения ПЦР мочи на туберкулез заранее приобретают специальный набор, состоящий из емкости с крышкой, трубки, пробирки.

В тару собирают первую порцию урины. Емкость закрывают крышкой и вставляют пробирку. Заполненную тару отвозят в лабораторию, а контейнер и трубку помещают в специальный мешок для отходов.

Достоинства и возможные неточности

ПЦР применяют для диагностики туберкулеза благодаря таким достоинствам, как:

• высокая чувствительность;
• специфичность, позволяющая дифференцировать стадию болезни;
• скорость постановки;
• универсальность.

Метод имеет следующие недостатки:

• для проведения теста необходимо специальное оборудование;
• специалист должен обладать высоким уровнем знаний.

Какой врач может назначить анализ ПЦР

Тяжелое заболевание, вызванное палочкой Коха, лечит пульмонолог, который назначает специальное обследование:

• рентгенографию органов грудной клетки;
• флюорографию;
• Диаскинтест;
• пробу Манту;
• ПЦР-исследование;
• ИФА;
• биопсию тканей;
• гистологическое исследование.

Фтизиатр назначает лечение больному, выписывает противотуберкулезные лекарства, контролирует эффективность терапии. Если болезнь запущена и лечение не приносит облегчения, выполняют оперативное вмешательство, удаляя пораженную часть легкого.

Как подготовиться к процедуре взятия биоматериала

Кровь на ПЦР сдают натощак или спустя 8 часов после приема пищи. В некоторых случаях допускается легкий завтрак. В меню включают кашу без сахара или вареное яйцо. Из напитков разрешена чистая кипяченая вода.

Если у пациента берут мазок из горла на ПЦР, ему нельзя чистить зубы, принимать пищу за 3-4 часа до начала исследования. Перед сдачей анализа запрещено пользоваться жевательной резинкой.

Мочу собирают в утренние часы в чистую стерильную емкость.

Мазок на ПЦР из половых органов берут у мужчин и женщин.

Перед сдачей анализа пациент обязан выполнять следующие требования:

• воздерживаться от половых контактов в течение 2 суток;
• отказаться от применения вагинальных свечей, антисептиков, используемых для подмывания наружных половых органов, спринцевания.

Требования, выдвигаемые к лаборатории

В помещении необходимо выделить несколько зон для:

• приема и регистрации материала;
• изучения ДНК;
• создания реактивов и выполнения ПЦР;
• уничтожения продуктов, образовавшихся при увеличении количества копий специфичной последовательности ДНК путем электрофореза.

В лаборатории оборудуют дополнительные помещения:

• архив;
• комнату для медперсонала;
• раздевалку для сотрудников;
• столовую;
• склад;
• туалет;
• комнату для автоклава.

Кабинеты для работы оснащены боксом. В зоне для определения ДНК готовят ПЦР-состав, выполняют обратную транскрипцию РНК. Изготовление смесей осуществляют в боксе.

В каких случаях используется Манту и в чем разница

Скрининговое исследование охватывает большую часть людей, не требует использования специального оборудования, применяется в детских садах, школах, яслях. Реакция Манту часто дает ложноположительный результат, поэтому врач рекомендует пациенту проведение ПЦР. Больной сдает кровь для определения палочки Коха в организме.

Для проведения пробы Манту необходимы специальные условия, проверка имеет противопоказания. У больного после введения антигена может развиться анафилактический шок. Метод ПЦР безвреден для организма человека. У ВИЧ-инфицированных пациентов этот вид исследования не эффективен.

Особенности ПЦР для детей

Вовремя проведенная диагностика позволяет изучить клинические особенности туберкулеза у детей, имеющих положительные или отрицательные результаты ПЦР после сдачи анализов мочи или крови.

С помощью полимеразной реакции устанавливают, насколько эффективна проводимая химиотерапия у ребенка, больного туберкулезом.

Проводимое исследование устанавливает локальные формы патологического процесса у детей, входящих в группы риска. Постановка ПЦР ребенку помогает врачу прогнозировать развитие болезни, оценить эффективность воздействия химических препаратов на возбудителя туберкулеза.

Забор крови

Биоматериал для постановки реакции берут стерильным шприцем из локтевой вены. Жидкость помещают в пробирку с веществом, предотвращающим ее порчу. Кровь не сворачивается, сгустки отсутствуют.

Лаборант не встряхивает пробирку во избежание повреждения эритроцитов. Биологическую жидкость помещают в центрифугу, а затем изучают клеточный состав под микроскопом. В пробирку добавляют специальный фермент и выполняют еще один полимеразный тест. В процессе исследования образуются фрагменты ДНК, которые раскодируют.

Расшифровка анализа ПЦР

Результат исследования может быть отрицательным или положительным. Если врач с помощью полимеразной реакции определил возбудителя заболевания в организме пациента, результат считают положительным.

Количественный итог показывает, насколько эффективна проводимая терапия заболевания. Пациент сдает несколько анализов, врач сравнивает их, наблюдает динамику развития возбудителя в организме.

Сложная расшифровка результата позволяет установить точное количество палочек Коха.

Врач объясняет пациенту, что цифры, обозначенные в анализе, указывают на местонахождение очагов инфекции, стадию их развития и причину появления патологического процесса. На основании результатов исследования фтизиатр назначает комплексное лечение.

Средняя стоимость

Многие пациенты интересуются, сколько стоит ПЦР-анализ на туберкулез. Цена исследования отличается и зависит от типа лаборатории или медицинского центра. Стоимость анализа колеблется в пределах от 750 до 900 руб.