Определение группы крови и резус-фактора методом стандартных сывороток

Система АВО — наиболее распространенная в мире классификация человеческой крови. Основа разделения крови на 4 группы — принцип взаимодействия антигенов и антител. В эритроцитах (красных тельцах) человеческой биологической жидкости может находиться 2 агглютиногена — А и В, а в плазме 2 вида агглютинина — Анти-А и Анти-В. Их сочетание является тем признаком, по которому определяют группу — 0, А, В или АВ, соответственно, 1, 2, 3 или 4. Определение групп крови по стандартным сывороткам, содержащим антигены, — это простая и быстрая реакция.

Стандартные сыворотки

Суть метода

Определяют группу с помощью изогемагглютинирующих средств — лабораторных реагентов. Исследование проводится, когда смешивают реагент с нативной кровью, и при добавлении раствора натрия хлорида (0,9%).

В процессе исследования изучается, какие антитела (антигены) имеются у натива, а какие отсутствуют. Таким образом и определяется, какая кровь — 0, А, В или АВ.

В каждой группе свой набор агглютиногенов (антигенов) и агглютининов (антител):

  • 1 (или нулевая) — на поверхности красных кровяных телец присутствует антитело A и антитело B. При этом полностью отсутствуют антитела в сыворотке. Поэтому реакции агглютинации не происходит.
  • 2 — есть в крови агглютинин B (антитело), агглютиноген (антиген) А.
  • 3 — наличествует антиген В и антитело A.
  • 4 — присутствуют оба белка (2 антитела), и нет ни одного антигена. Она является наименее распространенной — около 8% населения.

Определение группы крови по стандартным сывороткам необходимо для того, чтобы при переливании агглютинация ни привела к летальному исходу того, кто подвергся гемотрансфузии. Реакция агглютинации, т. е. склеивания, происходит тогда, когда при попадании сыворотки на эритроциты натива начинается процесс уничтожения этих телец.

  Какая группа крови и резус-фактор у человека самые редкие в мире

Определение группы крови

Склеиваться клетки будут при взаимодействии антигена А и антитела A. И при взаимодействии антигена В и антитела B. При агглютинизации в пробе всегда появляются хлопья — склеенные между собой красные клетки.

Изготовление сыворотки

Сыворотки для определения группы крови производят в лабораторных условиях из плазмы человека-донора. Занимаются изготовлением этих реагентов в пунктах переливания. Пробы хранятся и перевозятся в герметических колбах при определенной температуре. В сыворотке для определения группы содержатся α- и β-гемагглютинины. На колбе указано, каковы концентрация этих белков, срок и температура хранения.

Проведение исследования

Исследование проводят 2 раза. Сначала простым способом, сразу после забора, затем методом перекрестной реакции в дезинфицированной лаборатории. Есть несколько условий проведения реакции. Узнать группу крови с помощью стандартных сывороток возможно при условии, что срок их годности не истек, а титр (концентрация) реагента будет 1:32 и выше. Важно соблюдение температуры в помещении +15…+25ºС .

Ход анализа таков:

  1. На тарелке и пластиковом планшете подписывают номера групп возле углублений.
  2. Пробы каждой сыворотки помещают в отведенные углубления в планшете (по 1 или 2 капли).
  3. Пипеткой отмеряют по капле крови самого пациента, располагают их рядом с сыворотками и несколько раз размешивают.
  4. В каждую пробу капают изотонический раствор натрия хлорида.
  5. Дополнительно используют сыворотку АВ.

Проведение исследования

По истечении 5 минут видны результаты. Для точности выполняют анализ с реагентами 2 разных серий выпуска. Бывает, что реакция агглютинизации плохая, тогда ее наблюдают через микроскоп.

  Как определить отцовство по группе крови и можно ли узнать родство с помощью таблицы

Обязательно во время проверки исследуют и то, какой резус-фактор — положительный или отрицательный. Резус — это белок, который у большого процента населения присутствует на поверхности эритроцитов. Если он есть, резус положительный. Если белок отсутствует, это фиксируется. Резус-фактор определяется с помощью плазмы и особой анти-Д-сыворотки.

Проверяется наличие резуса таким же образом, как и при определении разряда системы АВО — наблюдая за реакцией склеивания.

Результаты проверки

Первое исследование дает результаты через 3-5 минут. Простой метод со стандартными сыворотками дает 4 возможных варианта:

  1. В обеих пробах с сыворотками 2 и 3 групп агглютинации нет. Результат свидетельствует о том, что нативная кровь относится к первому разряду.
  2. Свертывание во всех пробах, кроме той, что под номером 2. Вторая группа.
  3. Обнаруживается агглютинация в пробе №3, в остальных — нет. Группа соответствует 3.
  4. Свертываемость во всех, включая сыворотку АВ. Группа 4.

Результаты проверки

Определение группы крови стандартными сыворотками возможно в любом медицинском учреждении, т. к. эту процедуру способна провести сразу после забора крови процедурная медсестра.

Метод перекрестной реакции и метод цоликлонов

Методом простой реакции группу устанавливают с помощью лабораторной сыворотки. Второй способ — метод перекрестных реакций — делается лаборантом. Для его проведения используют стандартные эритроциты и плазму самого пациента. Ее добывают, когда в процессе центрифугирования тяжелые клетки отделяются от плазмы.

Для проверки понадобится 2 капли сыворотки после центрифугирования и отстоя не менее чем 1, 5 часа. В лабораторную планшетку опускают 2 капли добытого биологического материала и добавляют каплю со стандартными красными кровяными тельцами. В первую каплю плазмы помещают кровяные тельца с агглютиногенами 2 группы, а во вторую пробу — с антигенами третьей.

  Диета (меню) по 4 положительной (отрицательной) группе крови и таблица продуктов питания для женщин

Метод перекрестной реакции считается контрольным и более достоверным. Реакция с эритроцитами оценивается следующим образом:

  • Агглютинация есть и в 1, и во 2 капле. Это кровь обозначается как 0 или 1.
  • Реакции нет в обеих случаях — это 4.
  • Реакция склеивания там, где добавляли эритроциты второй категории — это 2. И, соответственно, 3 группа, где контрольные эритроциты третьего варианта.

Метод цоликлонов

Группу системы АВО также можно установить и с помощью цоликлонов. Эти реагенты сделаны при помощи достижений генной инженерии из крови лабораторных мышей. Тут используют моноклональные антитела, продуцируемые только из одной антителообразующей клетки.

Adblock detector